Основы клинической морфологии зубов: учебное пособие

Обезвоживание. После декальцинации исследуемый кусочек помещают в растворы спиртов возрастающей концентрации (40 %, 60 %, 80 %, 95 % и абсолютный 100 % спирт). В каждом из растворов кусочек должен находиться от 24 до 48 ч, а в абсолютном спирте – не менее 48–60 ч. Удаление воды необходимо для последующей качественной инфильтрации материала целлоидином.

Заливка в целлоидин. Из абсолютного спирта исследуемый материал помещают в смесь спирта с эфиром (50 % на 50 %), которую периодически меняют в течение 48–62 ч. Затем из этой смеси кусочек переносят в 2 % раствор целлоидина в хорошо закупориваемую посуду и оставляют в нём на 2–4 нед. После этого фрагмент челюсти с зубами или зубы последовательно помещают в растворы целлоидина возрастающей плотности: 4 %, 6 %, 10 % и 1 2 %, сохраняя в каждом растворе для достаточной пропитки не менее 2–3 нед (иногда до нескольких месяцев). Последний целлоидиновый раствор вместе с исследуемым материалом помещают в эксикатор, где целлоидин постепенно высыхает и уплотняется, причем его уровень снижается наполовину.

Блоки, заключенные в целлоидин, нельзя оставлять в сухом состоянии. Их следует поместить в 70 % спирт, а для длительного хранения – в смесь 70 % спирта и глицерина в банках с притертой пробкой.

Окраска срезов. Режут блоки хорошо заточенными ножами. Затем срезы толщиной в среднем 12–15 мкм помещают в чашку Петри с 70 % спиртом. Обычно целлоидин сразу «не покидает» срезы, поэтому их монтируют на предметном стекле только после окраски, обезвоживания и просветления. Срезы окрашивают серией красящих реактивов.

Срезы чаще всего окрашивают гематоксилином Делафильда и эозином по обычной методике. После окраски срезы помещают в карбол-ксилол (для полного извлечения целлоидина), затем в чистый ксилол и после этого – на предметное стекло с последующим заключением в бальзам.

Для окраски срезов декальцинированных зубов используют метод Шморля. Срезы окрашивают в течение 10–12 мин раствором тионина, затем споласкивают водой и переносят в концентрированный водный раствор пикриновой кислоты на 1,5–2 мин. Снова споласкивают в дистиллированной воде, затем дифференцируют в 70 % спирте до прекращения отделения из срезов красителя (обычно 5-10 мин), обезвоживают в 96 % спирте, карбол-ксилоле и монтируют на предметном стекле с заключением в бальзам. В результате окрашиваются одонтобласты с отростками и дентинные трубочки.

Основное вещество дентина, а также дентинобласты хорошо окрашиваются азаном, особенно после предварительной фиксации в смеси «Суза» с декальцинацией в азотной кислоте. Дентин можно окрашивать по Вейденрейху в анилиновой воде с генциановым фиолетовым после фиксации в жидкости Ценкера с формалином и декальцинацией зуба в 5 % растворе азотной кислоты.

Для изучения пульпы предварительно расколотый продольно зуб фиксируют в 10 % нейтральном формалине или жидкости Ценкера. Затем кусочек ткани извлекают из полости зуба и заливают в парафин или целлоидин. Окраска срезов проводится гематоксилином и эозином, азаном и другими красителями, применяемыми для окраски рыхлой неоформленной соединительной ткани.

Декальцинация в сильной степени влияет на структуру тканей зуба (например, эмаль разрушается почти полностью обычными методами деминерализации). Поэтому в определенных случаях зубы изучают на сделанных тонких распилах – шлифах.

Зубы, предназначенные для шлифовки, должны сохраняться в 1 0 % нейтральном формалине. С помощью крупнозернистого, а затем мелкозернистого шлифовальных кругов можно получить шлифы зуба необходимой толщины, а затем произвести зачистку поверхности наждачной бумагой. Обтачивать зуб значительно тяжелее, чем кость. Целесообразно сначала залить зуб в гипс и шлифовать с двух сторон. Обточенный до 0,5–1,0 мм зуб вынимают из гипса и продолжают обтачивать до необходимой толщины. Затем шлифсполаскивают в эфире, сушат и монтируют на предметном стекле как обычно.

Исследование эмалевых призм проводят на продольных и поперечных шлифах. Для изоляции эмалевых призм зуб помещают в 5-10 % раствор хлористоводородной кислоты до размягчения эмали. Затем эмаль расщепляют иглой в кювете с изотоническим раствором хлорида натрия. Полосы Гунтера-Шрегера выявляют путем помещения продольного шлифа на несколько секунд в 5 % раствор азотной кислоты с последующей основательной промывкой проточной водой.

Окраска дентина на шлифах зубов проводится по методу Кохана-Фуррера. Шлифы помещают в насыщенный водный раствор сулемы на 5–7 дней, затем переносят в свежеприготовленный сульфид аммония на 3–4 дня до интенсивной черной окраски, высушивают и заключают в бальзам.

Выявление органического матрикса проводят по Готтлибу путем окраски тонких шлифов насыщенным подогретым раствором сульфоализариновокислого натрия: шлифы помещают в раствор на несколько часов, а затем гладко полируют поверхность шлифа в 95 % спирте. После этого шлифы проводят через абсолютный спирт и ксилол с последующим заключением в бальзам.

Цемент зуба исследуют на шлифах или декальцинированных срезах по методикам, применяемым для окраски костей [14, 27].

Изучение различных стадий развития зуба у эмбрионов экспериментальных животных проводят после декальцинации фрагментов челюстей с зубами в трихлоруксусной кислоте (после фиксации в фиксаторах Буэна, Ценкера или смеси «Суза») с последующей заливкой в целлоидин и окраской.

Тестовые задания

1. Границей основания коронки является:

а – линия эмалево-цементной границы; б – шейка зуба;

в – линия, соединяющая точки наибольшей выпуклости эмалево-цементной границы на вестибулярной и язычной поверхностях зуба;

г – линия, соединяющая точки наибольшей выпуклости эмалево-цементной границы на мезиальной и дистальной поверхностях зуба.

2. Высота зуба – это:

а – расстояние между наиболее удаленными точками коронки и корня при установке ножек штангенциркуля перпендикулярно условной срединной вертикали зуба;

б – расстояние от середины окклюзионной поверхности зуба до верхушки корня зуба при установке ножек штангенциркуля перпендикулярно условной срединной вертикали;

в – сумма высоты коронки и средней арифметической суммы всех корней;

г – расстояние от наиболее выступающей точки коронки зуба до уровня бифуркации корней.

3. Высота корня у однокорневых зубов измеряется:

а – по вертикали от верхушки корня зуба до линии, соединяющей точки наибольшей выпуклости эмалево-цементной границы с мезиальной и дистальной сторон;

б – по вертикали от верхушки корня зуба до его основания;

в – от верхушки корня зуба до уровня расположения затека эмали;

г – от верхушки корня зуба до наиболее выпуклой в сторону коронки точки эмалево-цементной границы на мезиальной поверхности.

4. Высота корня зуба у многокорневых зубов измеряется:

а – от верхушки самого длинного корня до уровня разветвления корней;

б – от верхушки самого длинного корня до линии основания коронки (корня):

в – как средняя арифметическая всех одонтомеров;

г – от верхушки самого длинного корня до уровня расположения затека эмали.

5. Высота коронки определяется:

а – как расстояние между наиболее выступающей точкой окклюзионной поверхности (режущего края) до уровня расположения затека эмали;

б – как расстояние между наиболее выступающей точкой окклюзионной поверхности (режущего края) до точек наибольшей выпуклости эмалево-цементной границы аппроксимальных поверхностей зуба;

в – как разность между высотой зуба и высотой корня;

г – как расстояние от середины окклюзионной поверхности (режущего края) до уровня расположения затека эмали.

6. Вестибулярно – язычный размер коронки определяется:

а – как расстояние между наиболее удаленными точками на мезиальной и дистальной поверхностях;

б – расстояние между наиболее удаленными точками на вестибулярной и язычной поверхносях;

в – расстояние между наиболее выступающими точками эмалево-цементной границы на вестибулярной и язычной поверхностях;

г – расстояние от затека эмали до окклюзионной поверхности на вестибулярной и язычной поверхностях.

7. 10 % нейтральный формалин применяется:

а – для фиксации фрагментов челюстей или зубочелюстных сегментов;

б – для деминерализации тканей зуба;

в – для обезвоживания гистологических препаратов.

8. Обезвоживание гистологических препаратов перед заливкой в целлоидин проводится: